C18反相色譜柱是高效液相色譜（HPLC）和超高效液相色譜（UHPLC）中常用、經典的色譜柱類型之一，因其優異的分離性能、良好的重現性和廣泛的適用性，被譽為“萬能柱”。

　　其核心結構由高純度硅膠基質和化學鍵合在其表面的十八烷基（C??H??）組成。這種長鏈烷基賦予固定相強疏水性，而流動相通常為水與有機溶劑（如甲醇、乙腈）的混合物，極性高于固定相，構成典型的“反相”體系。分離原理基于疏水相互作用：樣品中非極性或弱極性組分更易與C18鏈結合而保留時間較長；極性較強的組分則更快被洗脫。因此，C18柱特別適用于分離非極性至中等極性的有機化合物，如藥物分子、脂類、激素、多環芳烴、農藥殘留等。

　　C18反相色譜柱的保存需根據流動相成分（是否含緩沖鹽）選擇不同方案，核心原則是清除殘留物、防止微生物污染及固定相脫水塌陷。具體操作如下：

　　一、流動相不含緩沖鹽時的保存

　　1、清洗步驟

　　初始沖洗：用10%甲醇或乙腈水溶液沖洗10-20倍柱體積，溶解并洗脫強保留物質。

　　有機溶劑置換：改用純甲醇或乙腈沖洗10-20倍柱體積，置換柱內水分。

　　封存溶劑選擇：

　　短期保存（<1周）：可保留流動相并密封兩端。

　　長期保存（≥1周）：使用80%-100%甲醇或乙腈水溶液（如純甲醇）封存，防止固定相脫水。

　　2、操作細節

　　沖洗流速需低于分析流速（如0.5 mL/min），避免壓力沖擊損傷填料。

　　封存前確保柱內無氣泡，填料完q浸潤溶劑。

　　二、流動相含緩沖鹽時的保存

　　1、清洗步驟

　　緩沖鹽置換：

　　用不含緩沖鹽的初始比例流動相（如10%甲醇-水）沖洗20倍柱體積，溶解并洗脫鹽類。

　　改用10%甲醇或乙腈水溶液沖洗10-20倍柱體積，進一步去除殘留鹽。

　　有機溶劑置換：用90%甲醇或乙腈水溶液沖洗20倍柱體積，置換柱內水分。

　　封存溶劑選擇：最終保存在90%甲醇或乙腈水溶液中，防止鹽析出或微生物污染。

　　2、操作細節

　　緩沖鹽體系（如檸檬酸鈉、鋰鹽梯度）必須徹d置換，否則析出結晶會損傷填料。

　　沖洗過程中需監測電導率，接近純水水平時表明緩沖鹽已去除。

　　三、通用保存注意事項

　　1、環境條件

　　溫度：4-30℃（避免凍結或高溫導致填料收縮/膨脹），長期存放可冷藏（4℃），但需防止冷凍。

　　濕度：≤60%RH，避免潮濕導致金屬接頭銹蝕或霉菌生長。

　　避光：防止光照引發溶劑分解或固定相結構變化。

　　2、物理保護

　　密封：使用廠商提供的實心堵頭或專用柱端蓋擰緊，防止溶劑揮發。

　　存放方式：垂直放置于專用柱架或盒中，避免填料松動或塌陷；切勿平放或倒置。

　　防塵：用柱套或保鮮膜包裹柱子，防止灰塵污染接頭。

　　3、標識與記錄

　　貼標簽注明柱型號、內徑/長度、保存日期、保存溶劑及使用記錄（如“已用于食品樣本”）。

　　記錄使用次數、最后一次沖洗溶劑及保存狀態，便于追蹤性能變化。

　　四、特殊情況處理

　　蛋白質污染：

　　用0.1%三氟y酸水溶液:異丙醇（4:1,v/v）→乙腈:異丙醇（1:2,v/v,內含0.1%三氟y酸）→水:異丙醇（1:4,v/v）依次沖洗10-20倍柱體積。

　　無機鹽污染：

　　用熱水（60℃以下）或稀硝酸沖洗溶解無機鹽，隨后用純水和有機溶劑置換。

　　五、保存后啟用檢查

　　安裝后沖洗：用保存溶劑以低流速（0.2-0.5 mL/min）沖洗15-30分鐘，排空氣泡并恢復柱溫。

　　性能測試：進行空白梯度測試（如甲醇-水梯度），檢查基線平穩性和保留時間重現性，確認柱效正常。